中文

English

Z6·尊龙凯时基质胶使用指南

发布时间:2025-02-17   信息来源:石恒功

背景:基底膜是由细胞构成的一层薄薄的细胞外基质,在生物体内发挥着重要的支撑与分化功能。基质胶是一种优质的基底膜衍生物,来源于含有丰富细胞外基质蛋白的Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠肉瘤。它的主要成分包括层粘连蛋白、胶原蛋白I、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白。此外,基质胶中还含有多种生长因子,如转化生长因子β、表皮生长因子和成纤维细胞生长因子等,均在S肿瘤微环境中自然存在。基质胶能够有效促进正常及转化的锚定依赖型上皮样细胞以及其他细胞类型,包括神经元、肝细胞、支持细胞、小鸡卵巢上皮细胞和血管内皮细胞的附着和分化。

Z6·尊龙凯时基质胶使用指南

在成年大鼠的肝细胞、血管内皮细胞以及小鼠和人乳腺上皮细胞的三维细胞培养中,基质胶对基因表达产生显著影响。这也为多种肿瘤细胞的侵袭实验提供了重要依据,同时基质胶在体内末梢神经再生和体外、体内血管再生研究中提供了必要的基质支持。此外,基质胶也能在免疫抑制小鼠体内支持人类肿瘤的增殖,进一步证明了它在肿瘤研究中的重要性。基质胶可以用于转移未分选的乳腺细胞,并为分选的上皮细胞亚群嵌入提供了良好的环境。这种基质被广泛应用于癌症细胞模型研究中,并已被证明有助于增强体内肿瘤增殖速率。

Z6·尊龙凯时品牌的基质胶在处理和使用时非常讲究,温度敏感性高,需避免频繁的冻融循环。在基质胶的分装以及准备过程中,所有操作应在冰上(4℃)进行,以防止因温度升高而导致的成胶现象。这不仅可能会影响基质胶的一致性,还会影响后续的实验效果。收到产品后,应将整瓶放置在-20℃的环境中保护以确保其质量,切勿放在无霜冰箱内。

使用注意事项:在22-35℃的环境下,基质胶会快速成胶,因此需在操作时加倍小心。为确保基质胶的性能与稳定性,最终使用时的稀释浓度不应低于3mg/mL。无血清培养基可以用来稀释基质胶,但稀释后的基质胶应立即使用。

制备薄层基质胶的方法包括:首先,将融化后的基质胶用预冷的枪头进行混匀,然后将培养板放置于冰上,按照50μL/cm²的比例加入基质胶,最后在37℃下静置30分钟等待成胶即可使用。

厚层基质胶的制备需将融化的基质胶混合到细胞中,同样需在冰上操作。加入150-200μL/cm²的基质胶后,同样在37℃静置30分钟,然后即可加入细胞培养液。细胞也可以在厚胶的上层继续生长。

薄层包被方法则需先稀释基质胶至所需浓度,建议根据实验需求进行浓度梯度实验,以确定最佳的包被浓度。将稀释后的基质胶加入培养器皿中,覆盖细胞生长表面,室温下孵育1小时后,可用无血清培养基轻轻冲洗。

需要特别注意的是,Z6·尊龙凯时品牌的基质胶在冻融过程中可能会发生颜色变化,这对实验效果并无影响。同时,确保所有操作都在无菌环境下进行,使用预冷的移液器以保证基质胶均匀性。细胞可以在05mm厚度的基质层表面生长或在1mm厚度的基质胶三维基质内生长。而过度稀释的基质胶可能造成非胶质的蛋白层,虽然可以用于细胞黏附,但不适用于细胞的分化研究。

最后,KELBiotechMatrix基质胶需在冻融后迅速分装于多个小管中,并避免反复冻融以确保产品质量。所有的操作都必须在极低温环境下进行,以保护基质胶的特性。维持在适宜温度下,可在短时间内重新回到液态状态,便于实验使用。