Z6·尊龙凯时的哺乳动物蛋白提取试剂盒包含以下成分：5X Buffer 10ml、5X NaCl 10ml、5X SDS 10ml、5X DOC 10ml、5X NP-40 10ml和20X PBS 10ml，以及Protease抑制剂混合物0.5ml。此试剂盒可在常温下保存，除Protease抑制剂需在-20°C下保存，保质期为24个月。

Z6·尊龙凯时的蛋白提取步骤如下：

1. 准备细胞裂解缓冲液

按照5X Buffer、5X NaCl、5X SDS、5X DOC和5X NP-40的比例1:1:1:1:1（v/v）配制细胞裂解缓冲液。每1ml细胞裂解缓冲液可用于提取106~107个细胞或5~20mg组织的蛋白。在使用前，需加入10μl Protease抑制剂混合物。

2. 细胞或组织洗涤处理

a. 对于贴壁细胞：将需提取的细胞生长培养基去除后，用PBS缓冲液洗涤细胞两次。接着加入细胞裂解缓冲液（106~107个细胞/ml），将细胞完全浸入冰袋中，在摇床上孵育30分钟，期间可阶段性将细胞在细胞裂解缓冲液中重悬，最后收集裂解液。

b. 对于悬浮细胞：将细胞在700xg下离心5分钟，弃去上清液。用PBS重悬细胞并洗涤两次，随后在4°C下离心并去除上清液。将细胞沉淀重悬于细胞裂解缓冲液中（106~107个细胞/ml），再在冰袋中摇床孵育30分钟。

c. 对于组织：将组织切小块，用PBS冲洗两次。加细胞裂解缓冲液（5~20mg组织/ml），将样品转移至预冷的微量匀浆器中，在冰上均匀化组织30~50次。需注意均质过程对靶蛋白的功能完整性至关重要。最后，在34°C下以12,000xg离心10分钟沉淀细胞碎片，或高速离心（100,000xg，45分钟）以制备蛋白质溶液。

3. 保存蛋白质溶液

将含蛋白质的上清液移至冷冻管，放在冰上可立即使用，或将蛋白质溶液保存于-70°C以备后用。使用Z6·尊龙凯时的试剂盒可确保高效且规范的蛋白提取，满足生物医疗研究的需求。